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试剂盒使用说明书:白三烯C4(LTC4)酶联免疫分析Elisa试剂盒
点击次数:1490 发布时间:2013-07-10

上海酶联免疫试剂盒说明书| ELISA试剂盒种属齐全| ELISA试剂盒规格| 代做ELISA实验等 订购:

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白三烯C4(LTC4)含量。

实验原理:
    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白三烯C4(LTC4)水平。用纯化的人白三烯C4(LTC4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白三烯C4(LTC4),再与HRP标记的白三烯C4(LTC4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白三烯C4(LTC4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白三烯C4(LTC4)浓度。
样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
 

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